[1]梅玫,任玉,周旋,等.反义miR-221/222上调p27kip1对MCF-7乳腺癌细胞系的放射增敏作用[J].中华乳腺病杂志(电子版),2009,3(6):622-632.
点击复制

反义miR-221/222上调p27kip1对MCF-7乳腺癌细胞系的放射增敏作用()

中华乳腺病杂志（电子版）[ISSN:1674-0807/CN:11-9146/R]

卷:
第3卷
期数:
2009年6期
页码:
622-632
栏目:
实验研究
出版日期:
2009-12-01

文章信息/Info

作者:
梅玫;任玉;周旋;祁艳斌;王鸿梅;张灏;申潇咏;赵川;苏征;姚智
天津医科大学基础医学研究中心（梅玫、任玉、祈艳斌、王鸿梅、申潇咏、赵川）;基础医学院免疫教研室（张灏、苏征、姚智）;天津医科大学附属肿瘤医院头颈一科（周旋）
关键词:
miR-221; miR-222; 乳腺肿瘤; p27kip1; 放射敏感性
摘要:
目的 探讨敲低miR-221/222表达上调p27kip1对MCF-7人乳腺癌细胞系放射敏感性的影响。方法 经生物信息学分析查询miR-221/222成熟体序列和它们与p27kip1的关系。脂质体共转染反义寡聚核苷酸(反义miR-221/222)后，用Northern blot法检测转染后MCF-7细胞miR-221、miR-222表达水平；将实验细胞分为6组：对照组、对照照射组、无义序列组、无义序列照射组、反义miR-221/222共转染组和反义miR-221/222共转染照射组。用MTT法检测细胞增殖及放射协同作用，流式细胞仪分析细胞周期，克隆形成实验检测细胞增殖，Western blot分析p27kip1蛋白的表达变化。数据间的方差分析采用F检验;两两比较采用LSD-t检验。结果 经生物信息学分析显示miR-221/222成熟体序列的种子序列几乎一致，p27kip1是miR-221/222的靶基因。Northern blot显示反义miR-221/222共转染组miR-221、miR-222的表达水平明显下降（miR-221：P=0.000；miR-222：P=0.000）。对照组及无义序列组之间miR-221、miR-222表达水平的差异无统计学意义（miR-221：P=0.371；miR-222：P=0.284）。MTT结果显示转染后第4天共转染组肿瘤细胞生长抑制效果最好，细胞增殖率明显低于对照组和无义序列组（P=0.000），但与放射治疗无协同作用（P=0.091）。流式细胞术检测可见共转染组细胞周期存在G0/G1期阻滞（P=0.000）。经放射治疗后，可明显降低S期比例（P=0.002）。克隆形成实验表明反义miR-221/222可增加MCF-7细胞的放射敏感性。Western blot显示反义miR-221/222共转染组的p27kip1蛋白表达明显上调（P=0.000）。结论 反义miR-221/222通过上调p27kip1蛋白表达可以增加MCF-7人乳腺癌细胞系放射敏感性。
更新日期/Last Update: 2009-01-20