[1]王梦川,吴爱国,王日玮,等.转染beclin 1 基因诱导自噬对三阴性乳腺癌BT-549 细胞生长的影响[J].中华乳腺病杂志(电子版),2013,7(1):12-19.
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转染beclin 1 基因诱导自噬对三阴性乳腺癌BT-549 细胞生长的影响()

中华乳腺病杂志(电子版)[ISSN:1674-0807/CN:11-9146/R]

卷:
第7卷
期数:
2013年1期
页码:
12-19
栏目:
论著
出版日期:
2013-02-01

文章信息/Info

作者:
王梦川;吴爱国;王日玮;原红军;李学孝;胡斌;邵国利;纪术峰;吴凯;范旭龙;郑临海
南方医科大学珠江医院普外科
关键词:
乳腺肿瘤beclin 1 基因自噬
摘要:
目的:探讨转染beclin 1 基因诱导三阴性乳腺癌BT-549 细胞发生自噬及其对细胞生长的影响。方法:将BT-549 细胞分为4 组,包括空白组、空载体组、脂质体组和目的基因组,并以MDA-MB-231 细胞作为阳性对照组。采用LipofectamineTM 2000 携带含有beclin 1 基因的质粒转染BT-549 细胞,分别于转染后24、36、48、60 h 用荧光显微镜观察转染效率;于转染后48 h 利用RT-PCR 检测各组细胞beclin 1 mRNA 表达情况;转染后各组细胞分别在含10%胎牛血清1640 培养基和无胎牛血清1640 培养基内培养,并分别于24、48、72、96 h 和12、24、36、48 h 采用MTT 法检测细胞的增殖率和存活率;各组细胞在无胎牛血清1640 培养基内培养24 h 后,采用流式细胞仪检测其细胞凋亡和细胞周期情况;各组细胞在无胎牛血清1640 培养基内生长36 h 后,经吖啶橙染色观察并比较发生自噬的细胞数。MTT 数据按重复测量的方差分析进行统计,其余计量资料按单因素方差分析进行统计,计数资料按照R伊C 表资料的χ2 检验进行统计分析。结果:48 h 时携带目的基因的质粒经脂质体转染BT-549 细胞的效率最高;目的基因组细胞beclin 1 mRNR 水平显著高于空白组、脂质体组、空载体组和阳性对照组(P<0.01);在含10%胎牛血清1640 培养基内,目的基因组细胞的增殖率显著低于空白组(F =112.1, P =0.00),而在无胎牛血清1640 培养基内,目的基因组细胞36 h 和48 h 的存活率显著高于空白组(F = 37.5, P =0.00);目的基因组细胞的凋亡比例增加(F =3914.4, P =0.00),且细胞处于G0 / G1 期的比例升高(F =258.8, P =0.00);目的基因组细胞发生自噬的数量显著增加(χ2 =7.7, P =0.00)。结论:向三阴性乳腺癌BT-549 细胞转染beclin 1 基因,可提高细胞的自噬水平。该作用可抑制细胞在正常培养环境下的增殖,但对低营养环境下的细胞存活具有保护作用。

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更新日期/Last Update: 2013-01-20