[1]鞠涛,金志强. 过表达转移抑制基因KAI1 对乳腺癌MDA-MB-231 细胞上皮间质转化的影响[J].中华乳腺病杂志：电子版,2015,9(4):252-256.
　[J].Chinese Journal of Breast Disease (Electronic Version),2015,9(4):252-256.
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 过表达转移抑制基因KAI1 对乳腺癌MDA-MB-231 细胞上皮间质转化的影响()

中华乳腺病杂志：电子版[ISSN:1674-0807/CN:11-9146/R]

卷:
第9卷
期数:
2015年4期
页码:
252-256
栏目:
论著
出版日期:
2015-08-01

文章信息/Info

作者:
 鞠涛;金志强
 湖北省随州市中心医院重症医学科
关键词:
 ; 乳腺肿瘤;  癌基因;  基因; 肿瘤抑制;  细胞系; 转化
文献标志码:
A
摘要:
 目的 探讨过表达转移抑制基因KAI1 对人乳腺癌MDA-MB-231 细胞上皮间质转化的影响。方法 利用慢病毒感染乳腺癌MDA-MB-231 细胞,获得稳定过表达KAI1 的细胞系(过表达KAI1组),并设置空白慢病毒感染的阴性对照细胞系(阴性对照组)及未处理的人乳腺癌MDA-MB-231 细胞为空白对照组。用Western blot 法检测KAI1 蛋白过表达的情况;采用RT-PCR 法检测过表达KAI1 对MDA-MB-231 细胞间质标志物(波形蛋白、N-钙黏蛋白和纤粘蛋白)的mRNA 表达水平的影响;并用Western blot 检测过表达KAI1 对MDA-MB-231 细胞间质标志物(波形蛋白、N-钙黏蛋白)的蛋白表达水平的影响;采用明胶酶谱检测过表达KAI1 对MDA-MB-231 细胞基质金属蛋白酶2(MMP2)和MMP9 活性的影响。多样本均数若满足方差齐性采用单因素方差分析,其两两比较采用LSD 法进行,若不满足方差齐性则采用Dunnett蒺s T3。结果 慢病毒感染MDA-MB-231 细胞后,各组间AKI1 蛋白表达有差异有统计学意义(F =25.610,P =0.001),并且与阴性对照组(0.575±0.065)和空白对照组(0.458±0.0500)相比,过表达KAI1 组(0.953±0.034)的KAI1 蛋白表达水平明显提高(P 均<0.050)。RT-PCR 检测表明,细胞间质标志物波形蛋白(F =10.268,P =0.012)、N-钙黏蛋白(F =32.159,P =0.001)和纤粘蛋白的mRNA(F =38.364,P =0.000)在各组间表达有差异。与阴性对照组(0.937±0.102,0.998±0.064,1.093±0.083)和空白对照组(1.000±0.000,1.000±0.000,1.000±0.000)相比,过表达KAI1 组(0.636±0.027,0.576±0.038,0.435±0.051) 的波形蛋白、N-钙黏蛋白和纤粘蛋白mRNA 表达水平明显降低(P 均<0.050),且Western blot 检测表明,各组间N-钙黏蛋白(F =9.172,P =0.015)和波形蛋白(F =14.441,P =0.005)表达有差异,与阴性对照组(1.068±0.032)和空白对照组(0.957±0.103)相比,过表达KAI1 组(0.597±0.032)的波形蛋白表达水平明显降低(P 均<0.050);与阴性对照组(1.452±0.036)和空白对照组(1.403±0.073)相比,过表达KAI1 组(1.100±0.073)的N-钙黏蛋白表达水平相似(P =0.080,0.067)。酶活性分析发现,各组间MMP2(F =18.928,P =0.003)和MMP9(F =21.310,P =0.002)表达差异有统计学意义,与阴性对照组(1.090±0.160,1.091±0.107)和空白对照组(1.000±0.000,1.000±0.000)相比,过表达KAI1 组(0.326±0.047,0.460±0.071) 的MMP2 和MMP9 表达水平明显降低(P 均<0.050)。结论 过表达转移抑制基因KAI1 能抑制人乳腺癌MDA-MB-231 细胞的间质表型。

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更新日期/Last Update: 2016-05-04