[1]李峻,李刚,谢玉莲,等. BTBD7 基因通过作用于Wnt/β-catenin信号通路促进人乳腺癌MCF-7细胞的侵袭转移[J].中华乳腺病杂志:电子版,2015,9(6):357-362.
 [J].Chinese Journal of Breast Disease (Electronic Version),2015,9(6):357-362.
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 BTBD7 基因通过作用于Wnt/β-catenin信号通路促进人乳腺癌MCF-7细胞的侵袭转移()

中华乳腺病杂志:电子版[ISSN:1674-0807/CN:11-9146/R]

卷:
第9卷
期数:
2015年6期
页码:
357-362
栏目:
论著
出版日期:
2016-02-29

文章信息/Info

作者:
 李峻;李刚;谢玉莲;王敏洪
 解放军第458 医院乳腺外科
关键词:
 乳腺肿瘤 同源盒结构域蛋白质类 WNT 蛋白质类 肿瘤侵润 肿瘤转移
文献标志码:
A
摘要:
 目的 观察敲减BTBD7 基因后人乳腺癌MCF-7 细胞的运动侵袭能力的变化,并探讨其作用机制。方法 将经慢病毒转染shRNA,敲减BTBD7 基因表达后的细胞作为实验组(MCF-7-shBTBD7),未进行慢病毒转染的细胞为对照组(MCF-7-vec)。应用划痕愈合实验、Transwell 侵袭实验、MTT 法绘制细胞生长曲线等方法来检测实验组和对照组内MCF-7 细胞的侵袭转移以及增殖能力之间的区别,两组试验结果比较采取独立样本t 检验。在此基础上通过肿瘤信号通路筛选芯片筛选出BTBD7 作用的下游信号通路,并以Western blot 实验验证这条信号通路是否确实参与其中发挥作用。结果 划痕愈合实验结果显示,与对照组相比,实验组MCF-7 细胞的迁移能力显著降低[24 h 愈合率:(85.95±5.30)% 比(43.38±4.01)%, t =18.108, P<0.001];Transwell 侵袭实验显示实验组和对照组细胞侵袭能力出现明显的差别,与对照组相比,实验组细胞的侵袭能力显著降低(24 h 细胞计数:152±7 比50±8,t =27.378,P<0.001);MTT 实验显示从第4 天开始两组细胞增殖能力出现差异,对照组细胞数为(3.17±0.23)×104 / ml,明显高于实验组的细胞数为(2.58±0.21)×104 / ml,差异具有统计学意义(t =3.189, P<0.050);第7 天对照组的细胞数为(9.57±0.36)×104 / ml,仍然显著高于实验组的细胞数(7.29±0.37)×104 / ml,差异具有统计学意义(t =7.654, P<0.050)。通过双荧光素酶检测系统检测肿瘤信号通路筛选芯片的结果表明Wnt 信号通路的相对荧光强度在两组间差异有统计学意义(t =12.509, P<0.001),Western blot实验结果同样表明,与对照组相比,实验组的c-Myc、MMP-7 以及β-catenin 的蛋白水平均发生变化。结论 BTBD7 基因可能通过作用于Wnt/ β-catenin 信号通路促进人乳腺癌MCF-7 细胞的侵袭转移。

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更新日期/Last Update: 2016-05-11