[1]钟琰,吴爱国,纪术峰,等.短发夹RNA 沉默促肝细胞再生磷酸酶-3基因表达对乳腺癌MCF-7细胞生长和侵袭能力的影响[J].中华乳腺病杂志(电子版),2011,5(3):313-322.
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短发夹RNA 沉默促肝细胞再生磷酸酶-3基因表达对乳腺癌MCF-7细胞生长和侵袭能力的影响()

中华乳腺病杂志（电子版）[ISSN:1674-0807/CN:11-9146/R]

卷:
第5卷
期数:
2011年3期
页码:
313-322
栏目:
实验研究
出版日期:
2011-06-01

文章信息/Info

作者:
钟琰;吴爱国;纪术峰;沈三弟
南方医科大学珠江医院普外科
关键词:
乳腺肿瘤; 促肝细胞再生磷酸酶-3; 短发夹状小干扰RNA; 基因治疗
摘要:
目的　构建以促肝细胞再生磷酸酶-3(PRL-3)为靶基因的短发夹状小干扰RNA(shorthairpinRNA,shRNA)表达载体,并探讨PRL-3-shRNA表达载体对人乳腺癌MCF-7细胞增殖、凋亡和侵袭能力的影响。方法　构建PRL-3基因特异性shRNA表达载体,使用脂质体法将PRL-3-shRNA表达载体转染入MCF-7细胞。采用Real-timePCR和Westernblot分别检测转染后MCF-7细胞中PRL-3基因mRNA和蛋白的表达;运用四甲基偶氮唑蓝(methylthiazolyltetrazolium,MTT)比色法检测转染后MCF-7细胞的增殖水平,用流式细胞仪检测细胞凋亡的情况;采用Transwell小室法检测细胞侵袭力变化。计量资料采用单因素方差分析或重复测量方差分析。结果　酶切鉴定和测序分析证实PRL-3-shRNA表达载体成功构建。转染成功后,shRNA-1～3组PRL-3基因mRNA表达分别为(0.31暲0.27)、(0.15暲0.14)和(0.31暲0.03),与空白组和阴性组(1.00暲0.00、0.98暲0.18)相比,差异有统计学意义(P<0.05)。PRL-3-shRNA-2组PRL-3蛋白的表达量明显低于阴性组和空白组(0.50暲0.02比0.91暲0.03和0.89暲0.02,P<0.05);PRL-3-shRNA-2转染入MCF-7 细胞后能明显降低其增殖水平(P <0.05);PRL-3-shRNA-2组凋亡率明显高于空白组和阴性组[(8.37暲1.85)%比(1.60暲1.58)%和(0.16暲0.05)%,P<0.05];Transwell小室侵袭实验显示,PRL-3-shRNA-2组穿膜细胞数明显低于阴性组和空白组(P<0.05)。结论　沉默PRL-3基因表达可抑制MCF-7细胞的增殖,促进凋亡,抑制其侵袭能力。

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更新日期/Last Update: 2011-01-20